微孔板材料的固有污染如何控制？

北京亙辰科技有限公司  Frank Han

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文章介紹

   在先前的獨(dú)立評(píng)估報(bào)告（“Extractables Testing in Deep Well Plates”, 2005）中，已表明，市面上銷售的許多品牌的微孔板使用低級(jí)聚丙烯聚合物，內(nèi)含顯著水平的浸出物污染。（即具有嚴(yán)重污染）

   肯特大學(xué)化學(xué)系代表Porvair Sciences R＆D對(duì)市面上的商業(yè)化微孔板做進(jìn)一步和更詳細(xì)的的研究。在許多商業(yè)化微孔板的樣品中再次發(fā)現(xiàn)有顯著性水平的浸出物污染。這項(xiàng)新實(shí)驗(yàn)不僅測(cè)試了“天然”聚丙烯微孔板，而且測(cè)試了更廣泛的彩色和黑色的微孔板。

   該研究于2013年初進(jìn)行，提供了來(lái)自歐洲，美國(guó)和中國(guó)的眾多制造商的大量微孔板的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。質(zhì)譜數(shù)據(jù)顯示：在測(cè)試的微孔板中發(fā)現(xiàn)了來(lái)自原材料的浸出物污染非常顯著。

研究背景

   在本文中確定浸出物污染比較復(fù)雜，長(zhǎng)鏈烴污染物在任何光譜中定會(huì)引發(fā)外源熒光信號(hào)，甚至在大規(guī)模篩選中會(huì)引起全細(xì)胞凋亡或停滯的假陽(yáng)性。在法醫(yī)學(xué)中，這些浸出物污染很容易掩蔽濫用的藥物或其代謝物并引起離子抑制，導(dǎo)致定量不準(zhǔn)確。

研究方法

   從各品牌制造商處獲得用于測(cè)試的微孔板樣品。選擇新的未使用的板，用干凈，干燥的壓縮空氣流去除可能積聚的任何顆粒物。通過(guò)在每個(gè)樣品板的三個(gè)孔中孵育適當(dāng)體積的HPLC級(jí)甲醇過(guò)夜來(lái)進(jìn)行聚合物浸出和可提取污染物的測(cè)試。甲醇中加入10ug / ml的Caffeine 作為內(nèi)標(biāo)。將板用封膜機(jī)密封并靜置過(guò)夜。過(guò)夜孵育后，250℃下對(duì)每個(gè)孔樣品的1ul等分試樣，并在GC-MS系統(tǒng)上使用不分流進(jìn)樣進(jìn)行分析。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

   綠色表示無(wú)污染。 黃色表示輕微的污染，只有一種污染物，且不一定在三個(gè)測(cè)試孔中都出現(xiàn)。紅色表示污染非常嚴(yán)重。

本研究中使用的板/管來(lái)自美國(guó)和歐洲、中國(guó)的不同來(lái)源的制造商。

污染物識(shí)別

   將提取的污染物與NIST數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比較以鑒定所涉及的化學(xué)品。這些化學(xué)品顯示為注塑過(guò)程中的塑料增強(qiáng)劑和模具流動(dòng)劑的組合。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

   本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)來(lái)自不同品牌的微孔板顯示浸出物污染嚴(yán)重。某些制造商在生產(chǎn)微孔板時(shí)使用低等級(jí)聚丙烯，含有流動(dòng)改性添加劑或“脫模劑”用于簡(jiǎn)化生產(chǎn)及模制過(guò)程。

    結(jié)果表明，高質(zhì)量醫(yī)療級(jí)聚丙烯雖然容易獲得，但是超過(guò)一半的測(cè)試板表現(xiàn)出不同程度的浸出物污染，與2005年的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室測(cè)試一樣，所有Porvair科學(xué)公司的深孔板均顯示無(wú)污染。

建議

建議定期評(píng)估用于在有機(jī)溶劑中長(zhǎng)期儲(chǔ)存樣品的微孔板，以檢查是否有浸出物污染。在進(jìn)一步分析儲(chǔ)存化合物或樣品之前，應(yīng)從制造商處獲得微孔板的純度證書(shū)。在不清楚是否有污染的情況下，應(yīng)進(jìn)行浸出物污染測(cè)試，以防止有價(jià)值的化合物或樣品面臨被污染的風(fēng)險(xiǎn)。

關(guān)于Porvair科學(xué)

   Porvair科學(xué)，微孔板產(chǎn)品的制造專家，服務(wù)生命科學(xué)，生物技術(shù)，醫(yī)藥研發(fā)和分子生物學(xué)的微孔板解決方案的所有應(yīng)用。也為各*生物公司設(shè)計(jì)zui通用的過(guò)濾板，包括Waters，Millipore，Qiagen，Whatman，GE Healthcare，Varian，Biotage、當(dāng)然還有Porvair。